叶绿素仪是一款专用测定植物叶绿素含量的检测仪器,该款仪器在各领域中均有广泛的运用。叶绿素含量是反映植物特别是光合机构生理状况的一个基本指标,植物生理研究中经常涉及叶绿素含量的测定。但如何测定叶绿素含量,迄今尚未见到一篇简便方法的介绍。不少研究论文和实验教材(中国科学院上海植物生理研究所和上海市植物生理学会;侯福林;藤利荣和孟庆繁;李玲中提到或介绍的测定方法一般都包括叶片称重、研磨、冲洗、过滤和定容(25mL或更多)及稀释等繁琐步骤,既费时间,又费溶剂,不适于科学研究中大批量样品的测定,特别是以叶片鲜重表示的叶绿素含量,不仅容易受叶片含水量变化的干扰,给测定结果带来偏差,而且也不便于同以单位叶面积表示的光合速率联系起来分析两者的关系
使用叶绿素含量测定仪不少实验教材中介绍的研磨过滤方法提取叶绿素,不仅费时间,从称重到定容结束,1个样品至少需要10min,而且由于不可避免的损失,所得到的结果一般会低一些;而用本文中的叶丝浸提法,不算浸提的等待时间,从取样、切细到投入80%丙酮浸提的操作时间一般不超过1 ̄2min,而且可以避免过滤造成的损失(图1)。从用两种方法测定的结果可以看到,用叶丝浸提法得到的叶绿素提取液可以直接用于比色测定光密度,不需要过滤或离心(图2)。虽然在用叶片细丝的浸提液中含有少浸出物的杂质,但由于其对比色波长的光没有明显的吸收,所以测定的结果受到的影响并不明显。众所周知,由于自然条件下光强、气温和土壤水分状况及叶片蒸腾作用的变化,叶片的含水量在一天内的不同时刻会明显不同,特别是在遭遇干旱或水分胁迫处理时,处理和对照叶片的含水量会明显不同。在这种情况下,以单位叶片鲜重表示叶绿素含量会造成导致错误结论的假象。图3结果清楚地说明了这个问题:虽然以单位叶面积表示的叶绿素含量是一样的,可是在以单位叶片鲜重表示时,那些含水量高的叶片叶绿素含量明显降低。
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