一、服务简介
    shRNAs(RNA-ShorthairpinRNAs):即短发夹RNA,是能够形成发夹结构的非编码小RNA分子。克隆到载体中的shRNA包括两个短的反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔,组成发夹结构,由polⅢ启动子(如人/鼠源的U6启动子和人H1启动子)控制,随后连上5-6个T作为polⅢ的转录终止子。
我们可以根据靶基因设计shRNA,并合成2条互补的、编码shRNA的DNA单链,退火后连接到慢病毒载体的polⅢ 启动子下游。shRNA慢病毒载体转染细胞后,经由细胞内的RNAi通路处理形成siRNA而最终发挥干扰作用。
二、技术优势
    1、 用途广泛,既可被包装产生shRNA慢病毒,又能以质粒形式转染细胞;
    2、 与化学合成的siRNA相比,shRNA以质粒或病毒形式进入细胞,不易降解,更稳定;
    3、 载体多样,筛选标签种类丰富。
三、服务内容
    1、  设计shRNA序列:根据目的mRNA序列设计3条shRNA序列;
    2、  模板合成:合成每条编码shRNA的单链DNA模板,退火形成DNA双链。模板链后面连接RNAPolyIII聚合酶转录终止位点,且两端分别设计酶切位点;
    3、  DNA双链和慢病毒载体的连接;
    4、  连接产物的转化;
    5、  测序验证。
四、服务须知
服务项目客户提供交付产物实验周期shRNA慢病毒载体构建1、靶基因的序列或设计好的shRNA序列
2、指定载体1、shRNA慢病毒载体
2、载体图谱、测序结果2-3周
五、具体实验周期及费用:请咨询我司客服人员