【原理】
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物磺胺二甲基嘧啶与微孔条上预包被的偶联抗原竞争其抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺二甲基嘧啶的含量成负相关,与标准曲线比较即可得出残留物磺胺二甲基嘧啶的含量。
【试剂盒技术指标】
规 格:96孔/盒
灵 敏 度: 1ppb
检测时间: 80min
样本检测下限:
鸡 肉 / 肝、猪 肉 / 肝、鸡蛋、蜂 蜜 ……………… 1 p pb
血 清、尿 液…………………………………………4ppb
牛 奶 ………………………………………… 2 0 ppb
样本回收率
鸡 肉/ 肝、猪 肉 / 肝…………………………90% ±10%
鸡 蛋 ……………………………………65% ±10%
蜂 蜜、牛奶、血清 …………………………70% ±10%
试剂盒组成
1、微量测试孔:每条8孔,一板12条
2、标 准 液×6瓶:(1ml/瓶) 0ppb、 1ppb、3ppb、9ppb、 27ppb、 81ppb
3、酶标记物 7ml ……………………………… 红色帽
4、抗体工作液 10ml …………………………… 蓝色帽
5、底物A液 7ml ………………………………白色帽
6、底物B液 7 ml………………………………黑色帽
7、终止液 7 ml ………………………………黄色帽
8、20X浓缩洗涤液40 ml………………………白色帽
2X浓缩复溶液 50 ml……………透明帽
【所用仪器、试剂】
具备的仪器:微孔酶标仪、打印机、均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
微量移液器:单道20μl-200μl,100μl-1000μl、多道250μl
试 剂:乙酸乙酯、NaH2PO4?2H2O、Na2HPO4?12H2O、正己烷
【样本前处理步骤】
样本前处理须知
处理任何样本时,都必须注意:
(a)本试剂盒所检测的组织样本包括:动物组织、禽类和水产组织。eg:鸡、鸭、牛、兔、鱼、虾等。
(b)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(c)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时可对实验器具进行清洁,以避免污染干扰实验结果。
样本处理前需配制:
处理任何样本时,都必须注意:
(a)本试剂盒所检测的组织样本包括:动物组织、禽类和水产组织。eg:鸡、鸭、牛、兔、鱼、虾等。
(b)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更换吸头。
(c)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时对实验器具进行清洁,避免污染干扰实验结果。
样本前处理需配制:
配液1、0.02MPB缓冲液
称取2.58g Na2HPO4?12H2O和0.44g NaH2PO4?2H2O加去离子水500ml溶解。
配液2、样本复溶液:
将2×浓缩复溶液用去离子水以1:1稀(1份浓缩复溶液+1份去离子水),用于样本提取后 的复溶。
(a )动物组织(肌肉、肝脏等)、鸡蛋、虾、鱼等
1、称取2±0.05g组织样本于离心管中,加入6ml乙酸乙酯,充分混匀5min,于15℃,4000r/min以上速度离心10min;
2、移取3ml上清液至干净的玻璃管中,于50℃氮气或空气吹干;
3、加入已稀释好的复溶液1ml混匀,再用正己烷1ml混合30s。室温4000r/min,离心5min,除去上层液;
4、取20μl下层用于分析。
样本稀释倍数:1
注:在使用国家规定最高