原装进口核酸合成仪
 DNA合成仪原理
 
 DNA合成仪的固相合成原理
 即DNA3‘端固定于基质上,然后沿3‘向5‘方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于应用DNA聚合酶的DNA合成。
 
 DNA合成仪的合成过程
 一个碱基的3‘末端固定在树脂上,下一个碱基的5’-OH用二对甲氧三苯甲基DMT保护,碱基上的氨基用苯甲酸保护,然后对3‘-OH用氨基磷酸化合物进行活化。
 1.1个碱基的5’-OH和下个碱基的3‘-OH形成亚磷酸三酯,
 2.然后用碘氧化成磷酸三酯
 3.加入CHCl2COOH除去第二个碱基5’-OH上的保护剂DMT
 循环进行加入下一个碱基
 
 
 DNA合成仪合成完毕后
 1.用苯硫酚除去5’-OH上的保护剂DMT
 2.用浓氢氧化铵将片段与固体树脂断开,洗脱
 3.用浓氢氧化铵在加热的条件下除去碱基上的保护剂
 4.除去氢氧化铵,真空抽干
 5.液相色谱或者PAGE,回收片段长的。
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