罗氏潮霉素B目前常用于筛选和维持培养含潮霉素抗性基因的原核或真核细胞。
抗性基因:
对潮霉素B的抗性源自编码潮霉素B磷酸转移酶(Hph)的基因。至今发现两种来源:
Streptomyceshygroscopicus产生的Hph抗性基因
Escherichiacoli,Klebsiellapneumoniae内质粒携带的Hph抗性基因(常用)
罗氏潮霉素B生物应用:
1)筛选和维持培养稳定转染Hph载体的原核细胞或真核细胞(植物细胞和哺乳动物细胞)
2)由于作用模式的差异,常与G418(GeneticinTM),Zeocin?和blasticidin S联合使用,筛选稳定转染两个不同载体的细胞株
3)抗病毒剂,由于潮霉素B选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,而且具有抑制翻译的功效
4)作为驱虫药加入动物饲料
双抗性稳定转染细胞筛选的抗生素作用机制及抗性
抗生素抗性机制抗性基因哺乳动物筛选浓度
潮霉素B干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读Hph200~500μg/mL
G418干扰80S核糖体功能和抑制蛋白合成Tn5/Tn601100~1000μg/mL
Zeocin掺入或者切割DNA引起细胞死亡Shble50~100μg/mL
blasticidinS核糖体上抑制肽键形成Bsd/BSD3~50μg/mL
罗氏潮霉素B产品来源:http://www.wissen-bio.com/wbscell-SonList-1098137/
http://www.chem17.com/st251749/